La Chiesa di San Spiridione è di rito serbo-ortodosso, ed è nota anche con il nome di “Chiesa degli Schiavoni”. L’edificio fu costruito sulle fondamenta di una preesistente chiesa ortodossa che - nel Settecento - veniva utilizzata dalla comunità greca e da quella serba. Per alcuni contrasti tra le due comunità, e per l’accresciuto numero dei fedeli, fu necessario por mano al nuovo edificio. Il tempio attuale fu realizzato dall’architetto milanese Carlo Maciacchini, tra il 1861 e il 1868, su commissione della sola comunità serbo-ortodossa: oggi può accogliere fino a 1600 persone.
L’edificio, seguendo la tradizione orientale, presenta una pianta a croce greca sormontata da cinque cupole di colore azzurro. La pietra di costruzione è, in buona parte, di provenienza locale, ma le colonne sono in marmo di Verona ed i cornicioni in marmo di Toscana. L’interno presenta affreschi e pitture di pregio ma su tutto domina la stupenda iconostasi in legno massiccio, riccamente ornata da intagli, che divide il presbiterio dal resto della chiesa. Le quattro icone, raffiguranti la Madonna, Gesù, San Spiridione e l’Annunciazione, furono realizzate a Mosca all’inizio dell’Ottocento e sono ricoperte con oro ed argento. Notevole è anche il grande candelabro d’argento donato - in occasione di una visita a Trieste nel 1782 - dal granduca Romanov, futuro zar Paolo I.